HPLC测定大鼠肠道菌群中辛伐他汀及其代谢物的方法学研究

中国药物评价 ›› 2023, Vol. 40 ›› Issue (1): 78-82.

HPLC测定大鼠肠道菌群中辛伐他汀及其代谢物的方法学研究

方甜甜 1，钱彦华1，张龙敬2，吴怡2*，刘德华1，邵浩然2，黄千慧2

1.昆明市第一人民医院，云南昆明 650031； 2.昆明医科大学，云南昆明 650500

收稿日期:2022-08-31 修回日期:2023-02-01 出版日期:2023-02-28 发布日期:2023-02-28
基金资助:
云南省教育厅科学研究基金项目（No. 2019J1295）；云南省基础研究计划昆医联合专项（No. 202201AY070001-031）；昆明市卫生科技人才培养项目（No. 2020-SW（后备）-36）；昆明医科大学大学生创新性实验计划项目（2021JXD067，2022JXD220）

Determination of Simvastatin and Its Metabolites in Intestinal Microbiota of Rats by HPLC

1.The First People′s Hospital of Kunming， Yunnan Kunming 650031， China；
2.Kunming Medical University， Yunnan Kunming 650500， China

Received:2022-08-31 Revised:2023-02-01 Online:2023-02-28 Published:2023-02-28
Contact: fang tiantian E-mail:651160880@qq.com

摘要/Abstract

摘要： 目的：建立HPLC测定大鼠肠道菌群中辛伐他汀及辛伐他汀酸浓度的方法。方法：取含辛伐他汀或辛伐他汀酸的大鼠肠道菌群孵育液加入含有内标物（异替格瑞洛，浓度为：1×103 ng·mL-1）的蛋白沉淀剂沉淀，离心后取上清液进行HPLC分析。色谱条件：Amethyst C18-H色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相甲醇（A）-0.1%磷酸溶液（B）（80∶20）。检测波长237 nm，流速 0.8 mL·min-1，柱温 30 ℃，进样量50 μL。结果：采用甲醇溶液作为蛋白沉淀剂，含药菌液与甲醇溶液比例为1∶2时，在4 ℃下离心力为15 250 g离心，对辛伐他汀及辛伐他汀酸提取率最高。结论：该方法专属性强、提取率高、精密度好、操作简便，可应用于辛伐他汀相关的药动学研究。

关键词: font-size:medium, ">高效液相色谱（HPLC）；辛伐他汀；大鼠肠道菌群；方法学研究

Abstract: Objective：To establish a HPLC method for the determination of simvastatin and simvastatin acid in intestinal flora of rats. Methods： The intestinal microbiota incubation solution containing simvastatin or simvastatin acid was precipitated by adding protein precipitator containing internal standard(isoticagrelor， concentration： 1×103 ng·mL-1). After centrifugation， the supernatant was taken for HPLC analysis. Chromatographic conditions： Amethyst C18-H column(4.6 mm×250 mm， 5 μm)； Mobile phase methanol (A)-0.1% phosphate solution(B)(80∶20). The detection wavelength was 237 nm， the flow rate was 0.8 mL·min-1， the column temperature was 30 ℃， and the injection volume was 50 μL. Results： The extraction rate of simvastatin and simvastatin acid was the highest when methanol solution was used as protein precipitator， the ratio of drug-containing bacteria solution to methanol solution was 1∶2， and the centrifugal force was 15 250 g at 4 ℃. Conclusion： This method has strong specificity， high extraction yield， good precision and simple operation， and can be applied to the pharmacokinetic study of simvastatin.

Key words: font-size:medium, ">High performance liquid chromatography(HPLC)； Simvastatin； Intestinal flora of rats； Study of Methodology

中图分类号:

方甜甜 , 钱彦华, 张龙敬, 吴怡, 刘德华, 邵浩然, 黄千慧. HPLC测定大鼠肠道菌群中辛伐他汀及其代谢物的方法学研究[J]. 中国药物评价, 2023, 40(1): 78-82.

FANG Tian-tian, QIAN Yan-hua, ZHANG Long-jing, WU Yi, LIU De-hua, SHAO Hao-ran, HUANG Qian-hui. Determination of Simvastatin and Its Metabolites in Intestinal Microbiota of Rats by HPLC[J]. CHINESE JOURNAL OF DRUG EVALUATION, 2023, 40(1): 78-82.

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